Fermenti. Značilnosti talnih encimov. Kakor delo v organizmí
Razumevanje fermentacije
Encimi (encimi) Imenujem ga povezava ali pa je vezan z membranami za visoko katalitično aktivnost. ( Poleg білків katalitična aktivnost organizmi lahko kažejo delovanje RNA (ribozimi) in protiteles (abzimi), vendar je smrad v tisočkrat manj učinkovit, manj fermentiran.) Vonj po vonju po encimih persh_ dzherelakh. Biohimii, yaka vivchak fermentira, se imenuje encimologija... Na diagramih in v reakciji molekule encimov pomenijo - E... Recovini, ponovna izvedba tega, kar katalizira fermente, se imenuje podlage (S). izdelki encimske reakcije pomenijo - R... Poleg tega lahko fermente dobimo v steklenicah, ki jih na enak način dobimo v homogenem pogledu, pa tudi v drugih steklenicah. Za encime je značilna fizična in kemična moč, moč dojenčkov.
Specifikacija encimov iz anorganskih katalizatorjev:
a) pospeši reakcijo na smiselno učinkovit način;
b) zaradi visoke specifičnosti dela;
c) v fizioloških mislih obstaja regulacija;
d) díyut v mehkih mislih.
budova fermentira
Encime lahko uporabimo kot preproste, kot zložljive (kon'yugovany) steklenice, do skladišča katerih so lahko lipidi, ogljikovi hidrati, kovine, dušikove baze, stari vitamini. V telesu lahko encimi delujejo kot funkcija pri razvoju celice, pa tudi v prisotnosti nebistvenih kompleksov ali pa vstopijo v skladišče bioloških membran.
Zaradi specifičnosti encimov aktivno središče. Aktivno središče - zelo edinstvena kombinacija bližine v prostoru presežka aminokislin, ki bo preprečila:
a) prepoznavanje molekule substratu,
b) povezovanje substrata z encimom,
c) katalitična pretvorba (v primeru zložljivega encima v dejanju katalize skrbi tudi za usodo koencima, ki vstopi v aktivno središče pred skladiščem).
Aktivno središče je osvetljeno v trenutku, ko se bloki izklopijo in sprejmejo svojo izvorno (aktivno) konformacijo. Struktura aktivnega središča se lahko med interakcijo s podlago spremeni. Za figurativnim vislovom D. Koshlanda gre substrat v aktivno središče, roka pa do palčnikov.
Ena molekula encima, še posebej, če je shranjena v decimalni podenoti, je lahko omejena na več kot eno aktivno središče.
V aktivnem središču je dví dilyanka. Prva dilyanka je pozvana k prepoznavanju in povezavi s podlago. Vin se imenuje dilyanka, ki zveni v substratu, ali zasidran majdan. Druga dilyanka se imenuje katalitična, v njenem skladišču so presežki aminokislin, ki sodelujejo pri dejanju katalize.
Encimi so beljakovine, ki so močno razvite za molekulsko maso in zlaganje. Z uporabo encima z majhno molekulo, ribonukleazo, ga lahko shranimo v eno podenoto z molekulsko maso 13.700 Da. (Ribonukleaza ima aminokislinsko vzdržljivost. Leta 1969 je bila ribonukleaza sintetizirana v laboratoriju B.Merrifild v New Yorku.) Bagato encimi so shranjeni v eni pod enoti, na primer laktat dehidrogenaza je dva podtipa. Do danes obstajajo številni kompleksi več encimov, ki so shranjeni v več deset različnih pod-enotah in decilnih vrstah koencimov. Na primer, kompleks piruvat dehidrogenaze sestavlja 60 podenot treh vrst in pet vrst kofaktorjev. Molekularna teža takega kompleksa v prisotnosti dzherela v encimu postane 2,3 * 10 6 - 10 * 10 6 Da. Molekula encima je lahko manjša od molekule substrata. Na primer: molekule encimov amilaze in ribonukleaze so manj, manj molekul substratov - škroba in RNA.
Bilkov del zložljivih encimov je katalitično neaktiven in se imenuje apofenzim... Povezavo apoencima z brezalkoholno komponento je treba proizvajati, dokler katalizator ni odobren za katalitično aktivni encim (holoencim):
Bagato fermentacije v njihovih skladiščih za kovine, ki jih je mogoče viconuvati razvojne funkcije:
a) sodelujejo pri vključenem substratu in procesu njegove katalitične transformacije;
b) vzemite vezani koencim v molekulo encima;
c) stabilizirati strukturo tretina encima (na primer Ca 2+ v amilazi);
d) vibrirajte s substratom, pritrdite pravi substrat, za katerega encim.
Veliko koencimov je zastarelih vitaminov, zato se izguba govorne izmenjave v primeru pomanjkanja vitaminov razlaga z zmanjšanjem aktivnosti pevskih encimov.
Deyaki fermentira ukaz z aktivnim središčem za maščevanje alosterično (regulativno) središče - dilyanka bilkovske krogle, poza aktivnemu središču, lahko zveni besede in uravnava encimsko aktivnost. Govorne besede se imenujejo alosterične efektorji (alosterični aktivatorji ali ingibitorji)... Zaradi povezovanja efektorja z alosteričnim središčem opazimo spremembo strukture steklenice, kar vodi v spremembo prostorne rasti presežkov aminokislin v aktivnem središču, zaradi česar se spremeni encimske aktivnosti.
Encimi, ki se lahko ustvarijo v enem organizmu in katalizirajo enega ali istega drzna reakcija Vse s prvotno strukturo beljakovin se imenujejo izoencimi. Fermenti se po tem razvijejo ena vrsta fizične in kemijske oblasti, Molekulska masa jaka, toplotna stabilnost, specifičnost substrata, elektroforezna ohlapnost. Narava pojava izoencimov je vsestranska, vendar se pogosteje za vse zabavajo z idejami v strukturah genov, ki kodirajo izoencime ali podenote. Na primer, encim laktat dehidrogenaza (LDH), ki katalizira povratno reakcijo oksidiranega laktata v piruvat, je lahko podenota dveh tipov M in H, kombinacija teh podenot je osnova za nastanek petih lizoencimov. Za diagnozo bolezni srca in jeter je potrebno spremljati spekter izocimov LDH v krvi, aktivne snovi LDH 1 in LDH 2 v srčni mišici in krvnih celicah ter LDH 4 in LDH m 5 - že v poletje.
Slika 1 Budova LDH izoencimi.
Vimíryuvannya encimska aktivnost
Vrednost aktivnosti encimov med potovanjem vodi do razvoja reakcij. Pogostost encimskih reakcij se spreminja z zmanjšanjem koncentracije substrata ali povečanjem koncentracije produkta na uro:
v = -ΔС S / Δτ, v = ΔC P / Δτ,
de ΔC S- sprememba molske koncentracije na podlago (mol / l),
ΔC P- sprememba molarne koncentracije v reakcijski produkt (mol / l),
Δτ - ura (xv, sek).
Kinetični odmerek je pomembno izvesti pri visoki koncentraciji substrata, v tem primeru encim ne more pokazati največje aktivnosti.
Enkratna aktivnost encima:
Mednarodni enojni encim (U)- količina encima, ki katalizira pretvorbo 1 mikromola v substrat za 1 kilin pri temperaturi 25 ° C in optimalnem pH sredine.
V sistemu CI je en encim katav (kat) enako količino encima, ki katalizira transformacijo enega molarnega substrata v 1 sekundi. Ni pomembno pidrahuvati, scho:
1 U = (1 * 10 -6 M) / 60 s = 1,67 * 10 -8 M s -1 = 1,67 * 10 -8 kat = 16,7 ncat.
pogosto obiskujejo aktivno dejavnost pripravek v encimu je povečal aktivnost pripravka encima, izraženo v (U), na podlagi pripravka v miligramih:
A utripov = U / masa zdravila (mg)
S prečiščenimi encimi v pitomi se aktivnost poveča. Po rasti aktivnosti hišnih ljubljenčkov je mogoče soditi o učinkovitosti stopenj čiščenja in čistosti encimskega pripravka.
Za oceno aktivnosti visoko prečiščenih, homogenih pripravkov v encimih, število mednarodnih enot (U) na encim na enoto količine na encim (μmol) na enoto hitrosti molarna aktivnost(število ovojev). na fizični čarovnik molarna aktivnost - celotno število molekul na substrat, ki se prenese v eno molekulo encima za 1 pero ali za 1 sekundo. Na primer: za ureazo, ki pospešuje hidrolizo sehovine, molarna aktivnost postane 30.000, tripsin - 102, glukozna oksidaza - 17.000 ciklov na sekundo.
moč encimov
4.1. Mehanizem umetnosti. Encime lahko katalizirajo reakcije v seriji produktov, v takem rangu konstanta učinkovite reakcije postane trajna. Jaka in vsi katalizatorji, fermenti ne bodo spremenili ure doseganja cene rivnovagy. V velikem številu encimov pospešijo reakcijo v 10 7 - 10 14 -krat. Učinkovitost encimske katalize temelji na močnem zmanjšanju energije aktiviranja reakcije za pretvorbo substrata v produkt skozi prehodne plošče.
4.2. posebnosti dogodka... Posebnost reakcije s substratom in pot skozi encimsko reakcijo je začetek apofencima. Posebnost encima v obliki konjugacije izmenjave govora v organizmu.
Zdi se o encimih, kakšen smrad vuzka specifičnost substrata, Na drugi strani je vonj majhnega števila podlag. O Inodiju se lahko pogovarjate absolutno substratna specifičnost, na primer katalaza, ki katalizira samo eno reakcijo - odvajanje z vodnim peroksidom:
Za velike encime je značilno pogosta (široka, skupinska) Specifičnost substrataČe smrad katalizira skupino podobnih reakcij. Na primer, alkohol dehidrogenaza katalizira pretvorbo alkoholov v aldehid, substrati pa so lahko metanol, etanol, propanol in drugi alkoholi. To je dejstvo, da lahko alkohol dehidrogenaza oksidira nelinearne alkohole, pa tudi alkoholno skupino, ki jo lahko vključimo v zalogo zložljivih molekul, zimsko smetano, encim pa lahko katalizira transformacijo retinola v mrežnico. Seveda encimi zaradi široke specifičnosti substrata katalizirajo transformacijo substratov z dobro učinkovitostjo.
Tudi fermenti nadílení stereokemična posebnost: Їх aktivno središče porazdelitve molekul substratov glede na prostorno konfiguracijo. Na primer, oksidacija L-aminokislin je aktivna le tako kot L-aminokislin in absolutno ne obstaja na njihovih D-analogah. Za oksidacijsko deaminacijo D-aminokislin v živih organizmih je oksidaza D-aminokislin, ne pa tudi na L-aminokislinah. Dejstvo, da je aktivno središče povezano s posameznimi stereoizomeri s substratom, je osnova delovanja takšnih encimov, kot so racemazi, ki en stereoizomer pretvorijo drug v drugega.
Posebnost plemičev ponovnega razvoja Vendar pa se lahko en substrat iz drugih encimov pretvori v produkte, ki so razviti za strukturo in vlogo pri presnovi.
Vodena zadnjica: L-aminokislinska oksidaza prehrana na L-aminokislinah, ki jih pretvori v alfa-keto kisline z raztopino amoniaka in peroksidne vode.
L-aminokislina dekarboksilaza Povezana je s temi substrati in ne katalizira reakcije: dekarboksilacija iz formulacij biogenih aminov in oblike ogljikovega dioksida.
Z eno samo zadnjico obstaja možnost pretvorbe glukoza-6 fosfata iz enega od drugih encimov, enega za drugim z različnih presnovnih poti:
4.3. termolabilnost .
Kakor močno bogato močan, ko se temperatura encima prilagodi, pride do toplotne denaturacije, tako da se uniči nativna konformacija encima in spremeni struktura aktivnega središča. Fermenti ssavtov se popravijo z rahlo denaturirano pri temperaturah 40 o C.
Pri zyazyki z vyshekazanim encimske pripravke bazhano zberigati pri nizkih temperaturah. Eden najboljših načinov za varčevanje z encimi je liofilizacija (sušenje pri temperaturah, nižjih od -70 ° C v vakuumu), prenesena v delno denaturiran mlin za dodatne soli amoniaka in postavljena v hladilnik.
4.4. Prevalenca reakcij fluidnosti glede na temperaturo. Encimske reakcije, na primer kemične reakcije, so variabilne pri temperaturi. Ko temperaturo nastavimo za 10 ° C, se hitrost reakcije po Van't Hoffovem pravilu poveča 2-4 krat. Vendar pa je pri temperaturah 40 ° C na isti stopnji denaturacije encimov mogoče zmanjšati celotno aktivnost (slika 2):
Majhna. 2. Prisotnost tekočih encimskih reakcij v smislu temperature.
4.5. Resnost fluidnosti reakcije v smislu pH.Število tekočih encimskih reakcij v obliki pH je zvonaste oblike (slika 3). Vrednost pH, pri kateri pride do najhitrejše encimske reakcije, imenujemo optimalna (pH-optimum). Narava krivulj in vrednost pH optimuma sta posledica narave naboja skupin na substrat in naboja skupin na encim (še posebej tiho, ko vstopi v aktivno središče). Optimalni pH za višje encime je med 6,0 in 8,0 (slika 3).
Majhna. 3. Resnost tekoče encimske reakcije v smislu pH.
Jeth vinyatka pa je na primer pepsin najbolj aktiven pri pH 1,5 - 2,0, lužnata fosfataza pa pri pH 10,0 - 10,5 (slika 4)
Majhna. 4. Nanosi tekočih encimskih reakcij (v) kot pH sredine.
Pri skrajnih (še nižjih ali celo višjih) pH vrednosti poslabšanje terciarne strukture molekule povzroči encim, kar vodi v izgubo encimske aktivnosti.
Podobne informacije.
Razumevanje aktivnosti encimov
Splošni zdravniki biokemije praktično ne ocenjujejo količine encima, ampak le njegovo aktivnost. Dejavnost - širše razumevanje, manj število. Rezultat reakcije je rezultat reakcije in sama recesija na substratu ali kopičenje produkta. Seveda hkrati ni mogoče prezreti ene ure, če je encim očiščen in število molekul encima. Če je število molekul encima nerealno, se mora količina biološkega materiala maščevati encimu (obsyag abo mass).
Pri takem rangu je treba pri določanju aktivnosti encimov narediti tri spremembe hkrati:
- masa produkta zatemnjenega substrata;
- ura, vitrakcija za reakcijo;
- nekaj encima je, vendar zaradi izgube biološkega materiala, da bi se maščeval encimu.
Za jasnejše delovanje pomembnih dejavnikov s preprosto in preprosto zadnjico sta lahko dva proračunska uslužbenca. Proračuni so pripravljeni na produkt reakcije, delo je opravljeno z encimom, ekipa ne gleda biološkega materiala. Otzhe, zavdannya z 3. razreda:
- Na delavniški dan enega delavca je brigada 10 ljudi, na isti dan pa ekipa 5 ljudi. Posel se je končal čez noč in na splošno. Kakšna je dejavnost delovnih ljudi?
- Ekipa 10 ljudi je delala na dan ene stojnice s 3 površin, ekipa 10 ljudi pa je delala isti dan na 12 površinah. Posel se je končal čez noč in na splošno. Kakšna je dejavnost delovnih ljudi?
- Ekipa 10 ljudi je delala na dan ene kabine s 5 površin, ekipa z 10 ljudmi pa je delala isti dan. Prvi teden je trajal 20 dni, drugi 10 dni. Kakšna je dejavnost delovnih ljudi?
Osnove vrednosti encimskih aktivnosti
1. Aktivnost encima se vrti v likvidnosti akumuliranega produkta ali v likvidnosti substrata pri prenosu na količino materiala, da se encim prevzame.
Naj bo zdravnik hudoben:
- enojna količina govora - mol (in thith thith pusto mmol, µmol), gram (kg, mg),
- ob eni uri - khvili, eno uro, sekundo,
- odinitsі masi abo obsyagu - gram (kg, mg), liter (ml).
Dejavno vikoristoyutsya in druge izgube - katav (mol / s), mednarodna enota dejavnosti (ME, enota) idpovídaê µmol / min.
Tako se lahko aktivnost encima spreminja, na primer v mmol / s × L, g / leto × L, MO / L, mačka / ml itd.
Na primer, vidomo,
2. S standardno miselnostjo se lahko rezultati povečajo in rezultati se lahko prilagodijo v različnih laboratorijih - pH je optimalen in temperatura je nastavljena, na primer 25 ° C ali 37 ° C, pred uro inkubacije substrat z encimom.
encimska aktivnost prst [iz lat. Fermentum -ferment] -pdatn_st tla kažejo katalitični učinek na procese preoblikovanja eksogenih in organskih ter mineralnih spojin, ki so očitne v n_y encimih. Značilnost encimske aktivnosti tal je lahko na vrhu celotnega kazalnika aktivnosti. Encimska aktivnost zelenih tal ni enaka in je povezana z genetskimi lastnostmi in kompleksom medsebojno povezanih ekološki uradniki... Raven encimske aktivnosti tal je posledica aktivnosti encimov (invertaze, proteaze, ureaza, dehidrogenaze, katalaza, fosfataze), ki se vrtijo skozi več razgrnjenih substratov na 1 uro na 1 g
Biokatalitično aktivnost tal najdemo v fazi obogatitve z mikroorganizmi in v vrsti tal. Dejavnost encimov se spreminja glede na genetske vzorce, saj temeljijo na zysty humusu, vrstah reakcij, oksidnem potencialu in drugih kazalnikih za profil.
V dolgolistnih fosilnih tleh je intenzivnost encimskih reakcij predvsem v obzorju fosilne struge in v ornichi -orni shari. Vsa biološko manj aktivna genetska obzorja, ki se nahajajo pod obzorji A chi Ap, imajo lahko nizko aktivnost encimov. Njihova aktivnost se pri obdelavi tal nekoliko poveča. Razvoj fosilnih tal pred rastjo encimske aktivnosti vzpostavljenega gozdnega obzorja v okviru fosiliziranih tal se močno zniža, v svetu nove pridelave pa zemlja raste in postane zelo obdelana.
Encimska aktivnost slike stanja tal in notranjih sprememb, ki je prikazana v primeru kmetijske kulture kmetijstva. Do spremembe pride, ko v kulturo vnesemo tako dolga kot fosilna tla, pa tudi ko rast narašča.
Za vse biloruse v orničnih tleh se običajno porabi do 0,9 t / ha humusa. Zaradi erozije humus skrbno in brez rotacije od namakanja hiti do 0,57 t / ha humusa. Razlogi za razvlaževanje tal so izboljšanje mineralizacije tal organski govor, Obnova procesov novega humusa zaradi mineralizacije v povezavi s pomanjkanjem dobrote organske dobrote v tleh in zmanjšanjem encimske aktivnosti tal.
Biokemijska transformacija organskega govora v tleh je posledica mikrobiološke učinkovitosti zaradi vbrizganih encimov. encimska aktivnost talnega mikroorganizma
Posebno vlogo imajo encimi pri življenju tvarinov, roslina in mikroorganizmov. Fermenti v tleh igrajo vlogo pri padanju trave, hrani in mikrobnih presežkih ter pri sintezi humusa. Posledično žive besede iz pomembno uporabljenih preidejo v lahko dostopne oblike za rastoče in mikroorganizme. Fermenti so zelo aktivni, zelo specifični in imajo veliko praha. različnih misli Zovnishny sredina. Direktorji katalitične funkcije smradu bodo ohranili hitrost projekcije v telesu ali pozo velikega števila kemičnih reakcij.
Zlasti pri drugih merilih lahko encimska aktivnost tal služi kot vrhunski diagnostični pokazatelj za izboljšanje stopnje obdelave tal. Posledično je doslidzhen 4, str. 91, je bila ugotovljena nezaupanje med aktivnostjo mikrobnih in encimskih procesov ter opravljenimi obiski, ki povečajo vlažnost tal. Obdelava tal, ki jo uvaja dobrota, spreminja ekološke razmere in razvoj mikroorganizmov.
V določeni uri je bilo v bioloških objektih odkritih nekaj tisoč posameznih encimov, nekaj sto jih je bilo vidnih in odvzetih. Vidomo scho Klitina je živa Obstaja lahko do 1000 različnih encimov, ki bodo pospešili to kemično reakcijo.
Zanima me shranjevanje encimov in zmage, da bi lahko nenehno rasli, da bi izboljšali varnost tehnoloških procesov. Ker so encimi prisotni v naših bioloških sistemih, ki so takoj produkti in instrumenti naših sistemov, se sintetizirajo in delujejo pri fizioloških mislih (pH, temperatura, porok, prisotnost anorganskih ionov), ko je nekaj enostavno doseči. Kot izdelek vključuje tudi veliko procesov, je v nasprotju s sodelovanjem encimov, ni strupen in z njim je enostavno ravnati. Poleg tega se v bagatokh vipadkah fermenti, ki so pomožni v industriji, obravnavajo na ekološko varen način. Vrsta nebioloških katalizatorjev encimov ni le varna in izboljšana pred biološko razgradnjo, temveč tudi posebnost procesa, način razmišljanja z reakcijami visoke učinkovitosti. Učinkovitost in specifičnost encimov vam omogočata, da na kakovosten način odrežete ciljne izdelke, tako da je fermentacijski fermenti v industriji ekonomsko učinkovit. Stagnacija encimov v zraku, hitri vitrati vodijo do energije v tehnoloških procesih, spremembe v ozračju CO2, zmanjšuje tveganje absorpcije dovkilla stranski produkti tehnoloških ciklov.
Zastoj napredne kmetijske tehnologije se lahko spremeni v prijazni smeri mikrobioloških procesov, ne le enega, ampak tudi kroglice hrane v tleh.
Za brezplačno udeležbo poznih encimov je potrebna distribucija organski spoluk prst. Tako proteolitični encimi razgrajujejo beljakovine v aminokisline.
Ureaza ima kapaciteto shranjevanja do CO2 in NH3. Izjave soli amiaka in amoniynya služijo kot lutka dušikove vitalnosti roslina in mikroorganizmov.
Invertaza in amilaze sodelujeta pri cepitvi ogljikovih hidratov. Encimi iz fosfatne skupine odlagajo organofosforjeve spojine v tleh in imajo pomembno vlogo pri fosfatnem režimu.
Za označitev encimske aktivnosti tal uporabite najbolj razširjen encim, moč rasti talne mikroflore - invertazo, katalazo, proteazo in inshí.
V glavah naše republike je bilo najmanj doslidzhen 16, str. 115. Dokazi o spremembah učinkovitosti in encimske aktivnosti tal med antropogeno infuzijo ščitijo podatke, ki ne dajejo natančne navedbe narave sprememb z zlaganjem doseženih rezultatov v smislu spoštovanja
V zv'yazku od CIM Poshuk optimalno virіshennya problemi polіpshennya humus bo ґruntu i її fermentativnoї aktivnostі v določenem tleh in klіmatichnih Minds na osnovі rozrobki resursozberіgayuchih priyomіv glavni obrobіtku pochvio zastosuvannya gruntozahisnih sіvozmіn scho spriyayut zberezhennyu strukture zapobіgannya pereuschіlnennya terenu i polіpshennya їh yakіsnogo, da bo obnova pretočnost tal v primeru minimalnih vitratov, eno uro.
Doslidzhennya o vrednosti encimske aktivnosti MCD na podlagi razvoja bakterij je bila izvedena v stopnji chotiri. Za nadaljevanje balinanja glejte MCD na podlagi monokultur MCD-V (Bifidobacter bifidum longum), MKD-S ( Streptococcus termophilus), MKD-P (Propionobacterium acidi-propionicum), MKD-L (Lactobacillus acidophilus).
Meta doslіdzhen - vrednost vgrajevanja probiotičnih mikroorganizmov, ki vstopijo v skladišče MKD, sintetizirajo encime.
Na prvi stopnji po GOST 20264.4-89 "Encimski pripravki. Metoda določanja amilolitične aktivnosti "pri vseh bolnikih z MCD po Isonovi metodi se je začela skupna amilolitična aktivnost. Ansonova metoda shranjevanja pri hidrolizi škroba z encimsko-amilolitičnim kompleksom do dekstrina v molekulski masi.
Na drugem odru po GOST 20264.2-88 „Encimski pripravki. Metoda vrednotenja proteolitične aktivnosti "je začela skupno proteolitično aktivnost (PA) v pred-mladostniških fazah. Metoda inokulacije pri hidrolizi natrijevega kazeinata z encimskim kompleksom pri pH-7,2. Za vrednost PA nevtralne proteaze 0-10 u / ml spremenite minimalno redčenje. Kislinska proteaza se je začela pri pH-5,5, ko je potekala hidroliza beljakovin.
Na tretji stopnji V skladu s TU9291-008-13684916-05 se je v vseh predstavitvah MCD začel CELULOSOLITSKA aktivnost (CA). Metoda odkrivanja celulaze temelji na označevanju sinteze sladkorja kot rezultat hidrolize celulaze in kromatografskega papirja na encimu. Metoda priporočil Mednarodnega odbora IUPAC o biotehnologiji kot glavni test za aktivnost celulaze. Za enoto učinkovitosti celulaze vzemite enako količino encima, kot je za kromatografski papir pri 50 ° C in pH 4,8 koncentracija 1 mmol. Dejavnost se praviloma vrti v enotah na mil.
ostanim, četrti, oder povečana aktivnost lipaze (LA). Metoda dodelitve lipaze Skermanovi tehniki nasičenja na titriranem travniku maščobnih kislin, ki je bila sprejeta za drugo lipazo, z vikorijanom v kakovosti substrata oljčnega olja. V primeru pomembne lipaze je reakcija končana, shraniti jo je treba v 6,5 ml 1/15 M fosfat-citratnega pufra, 2,5 ml emulzije oljčnega olja v 1% raztopini polivinil alkohola v alkoholu: 3 ml ridini .
Prejšnji MCD na osnovi različnih mikroorganizmov-probiotikov so pokazali, da bi lahko vse prejšnje MCD nadomestile eno ali več skupin encimov (tabela 8). Tako je MKD-V pokazal prisotnost vseh pred-juvenilnih skupin encimov. MKD-R v svoje skladišče postavi tri skupine encimov: amilolitični, proteolitični in celulozolitični. V MKD-L obstajajo tudi tri skupine encimov: proteolitični, celulolitični in lipolitični, amilolitična skupina je šibko izražena. MKD-S ima v svojem skladišču dve skupini encimov: proteolitično in celulozno, amilolitično in lipolitično aktivnost prometa je šibka.
Tabela 8
Encimska aktivnost MKD, od / ml
Analiza podatkov, zavrnjenih zaradi predhodne obdelave encimske aktivnosti MKD, je lahko v visok korak celulazna aktivnost-od 64,46 (MKD-R) do 72,4 ie / ml (MKD-L).
MKD-S in MKD-V imata lahko enako aktivnost celulaze-66,7 u / ml.
Dovoljeno je, da vsi MCD nadomestijo kislo proteazo, pri kateri je hidroliza proteina zdrava pri pH-5,5. Največja aktivnost proteaz je odkrita v MKD -R - 7,5 u / ml, namensha - v MKD -L (1,0 u / ml). MKD-B vrednost proteazne aktivnosti 2,0, MKD-S-2,5 u / ml.
Aktivnost lipaze je navedena v MKD -L - 1,4 in v MKD -V - 12,6 u / ml. V MKD-S in MKD-R encim lipaze ni prepoznan.
Amilolitična aktivnost je ugotovljena v MKD -V - 11,2 in v MKD -R - 9,4 enote / ml.
Na sl. 1 ^ 1 grafično prikazuje vrednost encimske aktivnosti MKD.
Majhna. 1.
Majhna. 2.
Majhna. 3.
Majhna. 4.
Rezultati predhodno encimske aktivnosti MCD na osnovi mladih bakterij so uporabljeni v literaturnih podatkih o tistih, da je encimska aktivnost bakterijsko-preizkusna-volodiut. Naše predhodne raziskave so v skladišču MKD v nekaterih primerih odkrile encimske moči bifidobakterij s predčutnimi mikroorganizmi. Po podatkih je do 90% predstavnikov normalne flore črevesja perutnine shranjenih s sevi bifidobakterij. Bifidobakterijo najdemo v vseh črevesjih.
Encimske skupine, ki jih sintetizirajo, sodelujejo pri vseh encimskih procesih pri ponovni transformaciji živahne ljudske krme v črevesnem traktu. Dne A. I. Havkina (2003), bifidobakterije aktivno sodelujejo v procesih encimske pre-razgradnje krme, medtem ko se hranijo s hidrolizo beljakovin, fermentirajo v ogljikovih hidratih, absorbirajo maščobe in zaznajo encimske korake v celicah celotne kapacitete shranjevanja Otrimaní daní obveščajo o posebnostih in spektru fermentiranih encimskih skupin v prahu od pripadnosti mikroorganizmom do pevskih vrst in umov bivanja. Zaradi dejstva, da so zaradi svojih višjih lastnosti krivi za razvoj novih priporočil za dobavo tihih vrst probiotičnih krmnih dodatkov.
Tudi encimska aktivnost mikroorganizmov v bagatu je vsestranska. Po njihovem mnenju je mogoče ugotoviti ne samo vrsto in vrsto pripadnosti mikroba, temveč tudi pomen njegovih možnosti (tako imenovani biovari). Osnovno encimsko moč in kakovost je enostavno zaznati.
cepitev ogljikovih hidratov(Sugarolitična aktivnost), tj. Zdravje izčrpanosti sladkorja in alkohola z visoko vsebnostjo alkohola s kislino, kislino in plinom, vbrizgano sredi Giss, saj naj bi nadomestilo tisto v ogljikovih hidratih in indikatorju. Ko se kislina razcepi v ogljikovih hidratih, je to pokazatelj spremembe na sredini. Srednji tečaj se imenuje "vrstica vrstice". Mikrobi, ki ne fermentira danija v ogljikove hidrate, rastejo na sredini, se ne spremeni. Dokazi o plinu bodo nameščeni za osvetlitev žarnice na sredini z agarjem ali po tem, ko so jo kupili v "plovcih" na sredini. "Float" - epruveta iz bučke z zapečateno konico, ki je goro požgala, jo pred sterilizacijo položila v epruveto s sredino (slika 18).
Majhna. 18. Vivchennya saharolitična aktivnost mikroorganizmov. I - "vrstica vrstice": a - srednja vrstica z ogljikovimi hidrati і indikator Andrede; b - na primer sredina z indikatorjem BP: 1 - mikroorganizmi ne fermentirajo v ogljikove hidrate; 2 - mikroorganizmi fermentirajo v ogljikove hidrate s kislino; 3 - mikroorganizmi fermentirajo v ogljikove hidrate s kislino in plinom; II - kolonije mikroorganizmov, ki se ne odlagajo (brez ovir) in odlagajo laktozo (vijolice na sredini EMC - zliv, chervoni na sredini Endo - desničar)
Poleg tega je saharolitična aktivnost vivchayut sredi Endo, EMC, Ploskirêva. Mikroorganizmi, ki fermentirajo do kislosti, se nahajajo v sredini mlečnega tsukorja (laktoze), pritrdijo kolonijo - kislino zaradi spremembe barve očitnega na sredini indikatorja. Kolonije mikrobov, ki ne fermentirajo laktoze, brez hleva (raz. Slika 18).
Mleko z rastjo mikrobov, ki fermentira laktozo, izgori.
Z rastjo mikroorganizmov, kjer nastaja amilaza, na sredini z rosinovim škrobom pride do cepljenja na sredini. Veste o ceni, saj je Lugolova linija prinesla kulturo drobcev - barva sredine se ne spremeni. Necepanje škroba je celo posledica velikosti modrega hleva.
proteolitična moč(T.E. Dobrota cepljenja kroglic, polipeptidov itd.) Vivchayut na sredini z želatino, mlekom, sirovatko, peptonom. Ko rastejo na želatinasti sredini mikrobov, fermentirajo želatino, sredina zraste. Narava razvoja, kako se ujeti v majhne mikrobe, narašča (slika 19). Mikrobi, ki raztopi kazein (mlečni hrošč), viklikayut mleko peptonezatsiya - vono otekanje mleka syrovat. Ko se peptoni razdelijo, je mogoče videti indol, syrwater, amiak. Їх pokrov za dodatno pomoč indikatorja papírtsіv. Filtrirni papir se dolgo zavoha po petju, visi, deli z vuzhny prašiči do 5-6 cm in pri sejanju kulture na BCH pomaga pluti med njo in epruvetami. Inkubacija Pislya v termostatih bo zagotovila rezultat. Amiak wiklikak modri lakmus papirtsya; če je voda vidna na papyrtsi, ki izteka za 20% s svinčevim acetatom in natrijevim hidrogenkarbonatom, se sprejme odobritev svinčevega sulfata - papyretsya chorniyu; Indol viklikê pochvonіnnya papіrtsі, ki je iztekel z veliko količino oksalne kisline (raz. Slika 19).
Majhna. 19. Proteolitična moč mikroorganizmov. 1 - oblikujte želatino razrídzhennya; II - viznachennya sirkovodnyu; III - vrednost indola: 1 - negativen rezultat; 2 - pozitiven rezultat
Poleg pomembnih pomenov se gradnja mikroorganizmov pri razvoju živih substratov uporablja tudi za dodatne papirnate diske, ki uhajajo s pomočjo reagentov (sistem kazalnikov papirja "SIB"). Ti diski se spustijo v epruvete s pred-mladinsko kulturo in po treh letih inkubacije v termostatih pri 37 ° C lahko glede na spremembo barve diskov sodimo o porabi ogljikovih hidratov, aminokislin, žolčnih kislin, itd.
Hemolitična moč (zdravje ruinuvati eritrocitov) vivchayut na sredini s krvjo. Nemirna sredina bo hkrati jasna, na srednji strani v bližini kolonije pa bo območje luknjic (slika 20). Ko je methemoglobin odobren, je sredina zelena.
Majhna. 20. Hemoliza v bližini kolonij za rast na krvnem agarju
ohranjanje kultur
Vidílení in vivchení kulture (shtami), ki predstavljajo vrednost za znanost ali vyrobnístva, se v muzejih živih kultur. Vseslovenski muzej se nahaja v suvereni NDI standardizaciji in nadzoru medicinsko bioloških pripravkov. L.A. Tarasevich (GISK).
Vodja zberigannye je izobraževati življenje mikroorganizmov in napredovati pri njihovem ministrstvu. Za široko povpraševanje oslabite ali stisnite izmenjavo pri mikrobnem odjemalcu.
Ena najbolj temeljitih metod trivialnega ohranjanja kultur je liofilizacija - obešanje v vakuumu iz zamrznjenega mlina, ki omogoča nastavitev anabioze. Visushuvannya preživeti v posebnih aparatih. Kulturo vzemite v zaprtih ampulah pri temperaturi 4 ° C, lepše pri -30-70 ° C.
Prenova visečih pridelkov. Močno segrejte vrh ampule na polovici palete in jo z bombažno palčko, rahlo namočeno s hladno vodo, potisnite navzgor, na pobočjih se pojavijo mikroskopske pike, skozi katere se zlahka prebije v sredino ampule. Hkrati s prehodom skozi rosígrіtí deželo udarcev s sterilizacijo.
* (Če je na tamponu preveč vode, jo lahko popijete v ampulo in uničite sterilnost kulture: jo namočite skozi mikroskope, zato je v ampuli vakuum.)
Uwaga! Ne pozabite, da je v zaprti ampuli vakuum. Takoj, ko v njem spijete, ga spijete naenkrat skozi veliko odprtino, ga lahko potresete v ampulo kulture in statusa Wikida.
Ko sem me pustil oditi, sem hitro udaril in zagledal vrh ampule s pinceto. Odprtine rahlo opečemo s sterilnim pasteriziranim peresnikom ali pa ampuli dodamo brizgo s steklenico (juho ali izotonično). Namesto tega premešajte ampule in jih prenesite na sredino. V prvih pridelkih je mogoče povečati rast novih pridelkov.
Trivialno zberigati kultura je možna tudi v naravnem dušiku (-196 ° C) v posebnih nastavkih.
Metode netrivialnega ohranjanja kultur ofenzive: 1) subkultura (periodično ponavljanje sredi sredine) z intervali, tako da je mogoče najti moči mikroorganizmov, sredine in umov gojenja. Če ponovno nahranim kulturo, jo vzemite pri 4 ° C; 2) shranjevanje kroglice masla. Gojite kulturo v 5-6 cm velikem agarju, nalijte sterilno vazelinsko olje (kroglico olja približno 2 cm) in ga hranite navpično v hladilniku. Izraz je vzet od malih mikroorganizmov razvoja, do tistega iz epruvet, ki občasno obesijo kulturo, da ponovno razmislijo o življenju; 3) zberigannya pri -20-70 ° C; 4) zberigannya v zaprtih epruvetah. Po potrebi vzemite material, ki visi na sredini.
Nadzirajte hrano
1. Kaj vnesti v razumevanje "bakteriološke doslídzhennya"?
2. Kakšna kultura obstaja za tako izkušnjo?
3. Kaj je kolonija mikrobov, kultura, sev, klon?
4. Kako vstopiti v razumevanje "kulturne moči bakterij"?
zavdannya
1. Vivchit in opišite število kolonij. Prenos v kosilnice na agar in v sektor.
2. Vivchit in opiši naravo rasti - kulturo na poševnem agarju. V pripravljenem pripravku poiščite čistost in morfologijo kulture.
3. Perezova kultura iz poševnega agarja na juhi in na sredini diferencialne diagnostike. Vivchit in v protokol zapiši naravo rasti kulture na čičah in encimsko moč.